??? 自然殺傷細胞（NK cell, Natural killer cell）是一種細胞質(zhì)中具有大顆粒的細?胞，也稱NK細胞，由骨髓細胞發(fā)育而成。因為其非專一性的細胞毒殺作用而被命名。NK細胞主要分布于外周血中，占外周血單核細胞（PBMC）的5%～10%，淋巴結(jié)和骨髓中也存在NK細胞，水平較外周血低，但它可以消滅許多種病源體及多種腫瘤細胞。自然殺傷細胞會直接和陌生細胞接觸，并以細胞膜?破裂之方式殺死此細胞，可利用分泌穿孔素及腫瘤壞死因子，摧毀目標(biāo)細胞。目前研究認為NK細胞特異性表達CD56，而缺乏T細胞抗原CD3。一般認為在PBMC中分選到CD3- / CD56+的細胞即為NK細胞。

??? NK細胞屬于粒狀淋巴細胞，是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分，也是機體抗御感染和防止細胞惡性轉(zhuǎn)化的重要免疫調(diào)節(jié)細胞。它對靶細胞殺傷時既不需特異性抗體參加，也不需抗原預(yù)先致敏。卻能立即發(fā)揮非特異性殺傷靶細胞的作用，尤其是對多種腫瘤細胞有迅速殺傷和溶解作用。因此，NK細胞對癌癥的監(jiān)視作用和抵抗功能已越來越受到重視。

??? NK細胞可通過多種途徑被活化，包括細胞膜表面的CD2、CD3分子和多種細胞因子。

????1.?通過CD3分子的ζ鏈

??? NK細胞不表達TCR/CD3復(fù)合物，但部分NK細胞表達CD3ζ鏈，當(dāng)用CD16抗體刺激NK細胞活化時，ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化，引起胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高，IP3水平增加，促進細胞因子合成和ADCC作用。

????2.?通過CD2分子

??? CD2與CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK細胞，CD3 ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化。

????3.?自然殺傷細胞刺激因子

??? 自然殺傷細胞刺激因子（natural killer cell stimulatory factor, NKSF)對NK細胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin, LR)?對NK細胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用，?體外培養(yǎng)時加入上述細胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。

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NK細胞的功能

??? 1. 自然殺傷活性，NK細胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，可以直接通過分泌釋放穿孔素、顆粒酶、NK細胞毒性因子、TNF-α和TNF-β等對病毒感染的細胞、白血病細胞以及其他腫瘤細胞產(chǎn)生細胞毒活性，從而殺傷或者裂解靶細胞；

2. 抗病毒感染，NK可選擇性地殺傷病毒感染的靶細胞。由輔佐細胞或NK細胞所產(chǎn)生的IFN可協(xié)同NK的抗病毒作用，而對正常細胞有保護作用。另一方面，病毒感染細胞表面的病毒抗原和其它表面分子使得其對NK細胞的殺傷作用變得更加敏感。此外，NK細胞在體外還可殺傷某些細菌、真菌、原蟲等，可能與NK細胞釋放某些殺傷介質(zhì)有關(guān)。

3. NK細胞在免疫監(jiān)視、殺傷突變的腫瘤細胞可能比T細胞具有更重要的作用。某些疾病如Chediak-Higashi或X性聯(lián)淋巴增殖綜合征患者，由于NK功能缺陷對惡性淋巴細胞增殖疾病特別易感。

4. 參與骨髓移植后移植物抗白血病效應(yīng)：在體外NK細胞可殺傷某些淋巴樣和髓樣白血病細胞。骨髓移植后數(shù)周內(nèi)，來自供體的NK細胞在PBL中占相當(dāng)高的比例。此外，在體內(nèi)NK細胞還可殺傷某些不成熟細胞如骨髓干細胞、胸腺細胞亞群等。

????治療流程：

確定患者的入選標(biāo)準(zhǔn)→相關(guān)檢查→血液采集→分離外周血單個核細胞→培養(yǎng)NK細胞→獲得NK細胞→細胞回輸→療效評估→隨訪

培養(yǎng)方法：

1、治療前檢查血常規(guī)、凝血功能等常規(guī)項目；

2、用血液分離機采集病人外周血淋巴細胞或直接采集外周血；

3、在GMP實驗室里，從采集的外周血中分離出單個核細胞，經(jīng)多種細胞因子誘導(dǎo)、激活后進行增殖培養(yǎng)，此過程需要9-12天。

4、于培養(yǎng)的第9-13天開始分次回輸NK細胞，每次回輸過程大概1.5個小時。

5、一個療程約14-16天。此后視情況進行下一療程治療。

??? 1、可直接識別、殺死癌細胞，抑制腫瘤的生長及擴散；

2、可直接改善和調(diào)節(jié)患者的免疫力和神經(jīng)系統(tǒng)；

3、通過其分泌的因子抑制腫瘤附近新血管的增生，限制腫瘤生長；

4、分泌多種細胞因子，減少患者疼痛，提高生活品質(zhì)；

5、NK細胞療法可用于多種癌癥，尤其對血液腫瘤，肺癌、淋巴癌、食道癌、乳癌、肝癌等血流旺盛且血管較密集的腫瘤有很好的療效。

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