英文名稱：In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein
中文名稱：原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒, 熒光素標(biāo)記

原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 產(chǎn)品介紹：
原們細(xì)胞凋亡檢測試劑盒廣泛應(yīng)用于檢測細(xì)胞凋亡，包括利用瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脫氧尿嘧啶的DNA斷裂分析。這種方法涉及DNA片斷分離，從給定細(xì)胞群的高分子量DNA中分離出低分子量DNA。因此，這些方法不能提供給定細(xì)胞群或組織切片中單個(gè)細(xì)胞命運(yùn)的相關(guān)信息。鑒于此，個(gè)別凋亡細(xì)胞可放于顯微鏡下觀察，由于其發(fā)生凋亡時(shí)表現(xiàn)出核染色質(zhì)皺縮和破碎的獨(dú)特現(xiàn)象。但這種方法主觀性強(qiáng)，受限于在相對較短時(shí)間窗內(nèi)觀察（當(dāng)細(xì)胞形態(tài)變化太大時(shí)）。細(xì)胞凋亡早期標(biāo)志是核DNA連接區(qū)域的選擇性降解。DNA裂解將促使雙鏈或單鏈DNA破裂。兩種類型斷裂都可用游離3’-OH末端標(biāo)記的修飾核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 熒光素-dUTP）在酶促反應(yīng)中檢測到。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）催化脫氧核糖核苷酸獨(dú)立聚合為以3’-端結(jié)尾的單鏈和雙鏈DNA。這種方法被稱為TUNEL （TdT介導(dǎo)的dUTP-X 缺口末端標(biāo)記）。游離3’-OH也可利用DNA聚合酶標(biāo)記（模板依賴型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更靈敏快速。

» 樣本材料：懸浮細(xì)胞，細(xì)胞離心涂片器和細(xì)胞涂片制備，玻片上生長的貼壁細(xì)胞，冷凍和蠟包被的組織切片。
» 檢測原理：原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒基于對細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的單鏈和雙鏈DNA斷裂的檢測。凋亡細(xì)胞被固定和滲透。隨后，這些細(xì)胞和TUNEL反應(yīng)混合物（包含TdT和熒光素-dUTP）一起孵育。孵育期間，TdT催化熒光素-dUTP標(biāo)記的游離3’-OH添加到單鏈和雙鏈DNA中。清洗后，標(biāo)記物包含在DNA斷裂位點(diǎn)處，用流式細(xì)胞儀和/或熒光顯微鏡可觀察到。
» 產(chǎn)品成份：酶溶液（TdT）& 標(biāo)記溶液（熒光素-dUTP）
» 產(chǎn)品應(yīng)用：利用熒光顯微鏡在單細(xì)胞水平定性檢測細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞儀定量檢測調(diào)亡細(xì)胞

產(chǎn)品特性：
• 靈敏：直接用熒光素-dUTP標(biāo)記降低了背景標(biāo)記
• 快速：熒光素-dUTP標(biāo)記在TUNEL反應(yīng)結(jié)束后就可直接進(jìn)行樣本分析（1-2 h）
• 方便：不需要進(jìn)行二次檢測
• 精確：分子水平鑒定早期細(xì)胞凋亡（DNA鏈斷裂）