英文名稱：In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein
中文名稱：原位細胞凋亡檢測試劑盒, 熒光素標記

原位細胞凋亡檢測試劑盒 產品介紹：
原們細胞凋亡檢測試劑盒廣泛應用于檢測細胞凋亡，包括利用瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脫氧尿嘧啶的DNA斷裂分析。這種方法涉及DNA片斷分離，從給定細胞群的高分子量DNA中分離出低分子量DNA。因此，這些方法不能提供給定細胞群或組織切片中單個細胞命運的相關信息。鑒于此，個別凋亡細胞可放于顯微鏡下觀察，由于其發(fā)生凋亡時表現(xiàn)出核染色質皺縮和破碎的獨特現(xiàn)象。但這種方法主觀性強，受限于在相對較短時間窗內觀察（當細胞形態(tài)變化太大時）。細胞凋亡早期標志是核DNA連接區(qū)域的選擇性降解。DNA裂解將促使雙鏈或單鏈DNA破裂。兩種類型斷裂都可用游離3’-OH末端標記的修飾核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 熒光素-dUTP）在酶促反應中檢測到。末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）催化脫氧核糖核苷酸獨立聚合為以3’-端結尾的單鏈和雙鏈DNA。這種方法被稱為TUNEL （TdT介導的dUTP-X 缺口末端標記）。游離3’-OH也可利用DNA聚合酶標記（模板依賴型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更靈敏快速。

» 樣本材料：懸浮細胞，細胞離心涂片器和細胞涂片制備，玻片上生長的貼壁細胞，冷凍和蠟包被的組織切片。
» 檢測原理：原位細胞凋亡檢測試劑盒基于對細胞凋亡早期發(fā)生的單鏈和雙鏈DNA斷裂的檢測。凋亡細胞被固定和滲透。隨后，這些細胞和TUNEL反應混合物（包含TdT和熒光素-dUTP）一起孵育。孵育期間，TdT催化熒光素-dUTP標記的游離3’-OH添加到單鏈和雙鏈DNA中。清洗后，標記物包含在DNA斷裂位點處，用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡可觀察到。
» 產品成份：酶溶液（TdT）& 標記溶液（熒光素-dUTP）
» 產品應用：利用熒光顯微鏡在單細胞水平定性檢測細胞凋亡，流式細胞儀定量檢測調亡細胞

產品特性：
• 靈敏：直接用熒光素-dUTP標記降低了背景標記
• 快速：熒光素-dUTP標記在TUNEL反應結束后就可直接進行樣本分析（1-2 h）
• 方便：不需要進行二次檢測
• 精確：分子水平鑒定早期細胞凋亡（DNA鏈斷裂）